液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)和高效液相色譜法(HPLC)均可用于測定動植物組織中的喹諾酮類抗生素,但它們在靈敏度、選擇性和多組分分析能力方面存在顯著差異。
喹諾酮類抗生素是一類廣泛使用的合成廣譜抗生素,它們主要通過抑制細菌DNA旋轉(zhuǎn)酶或拓撲異構(gòu)酶IV的活性來阻止細菌DNA復(fù)制,從而發(fā)揮抗菌作用。這類藥物在獸醫(yī)領(lǐng)域中被廣泛應(yīng)用,但也因過度使用而導(dǎo)致抗藥性問題和潛在的人體健康風(fēng)險。
指標 |
方法 |
標準 |
諾氟沙星、依諾沙星、環(huán)丙沙星、培氟沙星、洛美沙星、達氟沙星、恩諾沙星、氧氟沙星、麻保沙星、沙拉沙星、二氟沙星、 喹酸、氟甲喹 |
液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法 |
GB 31658.17-2021 食品安全國家標準 動物性食品中四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類藥物殘留量的測定 |
氟羅沙星、氧氟沙星、諾氟沙星、依諾沙星、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、洛美沙星、丹諾沙星、奧比沙星、雙氟沙星、沙拉沙星、司帕沙星、喹酸、氟甲喹、培氟沙星 |
農(nóng)業(yè)部1077號公告-1-2008 水產(chǎn)品中17種磺胺類及15種喹諾酮類藥物殘留量的測定 |
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萘啶酸、喹酸、氟甲喹、諾氟沙星、環(huán)丙沙星、培氟沙星、西諾沙星、洛美沙星、恩諾沙星、那氟沙星、氧氟沙星、沙拉沙星、二氟沙星 |
農(nóng)業(yè)部2349號公告-5-2015 飼料中磺胺類和喹諾酮類藥物的測定 |
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達氟沙星、恩諾沙星、環(huán)丙沙星和沙拉沙星 |
高效液相色譜法 |
農(nóng)業(yè)部1025號公告-14-2008 動物性食品中氟喹諾酮類藥物殘留檢測 |
農(nóng)業(yè)部781號公告-6-2006 雞蛋中氟喹諾酮類藥物殘留量的測定 |
高效液相色譜法(HPLC)
HPLC是一種基于液相色譜技術(shù)的分析方法,通過在高壓條件下將樣品通過固定相,依據(jù)化合物的理化性質(zhì)差異實現(xiàn)分離。在測定喹諾酮類抗生素時,HPLC通常配備有紫外檢測器或熒光檢測器,能夠檢測到一定濃度范圍內(nèi)的目標抗生素。HPLC的優(yōu)點是技術(shù)成熟、操作簡單,但在復(fù)雜基質(zhì)中分析時,可能會遇到選擇性和靈敏度的問題,尤其是在需要同時分析多種喹諾酮類抗生素的情況下。
液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)
LC-MS/MS是一種結(jié)合了液相色譜的高效分離能力和質(zhì)譜的高度選擇性和靈敏度檢測能力的先進技術(shù)。在測定動植物組織中的喹諾酮類抗生素時,LC-MS/MS能夠提供極高的選擇性和靈敏度,即使在低濃度下也能準確檢測和定量目標抗生素。更重要的是,LC-MS/MS能夠同時分析多種喹諾酮類抗生素,大大提高了分析效率和準確性,適用于復(fù)雜的基質(zhì)分析,減少了假陽性或假陰性的可能性。
應(yīng)用對比
在實際應(yīng)用中,HPLC-MS/MS通常用于需要更高靈敏度和更復(fù)雜樣品分析的場合,而HPLC則適用于較為簡單的樣品分析。例如,在動物源性食品中,HPLC-MS/MS可以用于同時檢測多種喹諾酮類抗生素,具有較高的靈敏度和選擇性。而在環(huán)境監(jiān)測中,HPLC可以用于檢測廢水中的喹諾酮類抗生素殘留,方法快速、準確,適用于高濃度有機廢水中喹諾酮類抗生素的同時測定。
選擇依據(jù)
1. 樣品復(fù)雜度:如果樣品中含有大量干擾物質(zhì),或者需要同時檢測多種抗生素,LC-MS/MS可能是更好的選擇,因為它提供了更高的分離能力和選擇性。
2. 檢測靈敏度:如果需要檢測低濃度的喹諾酮類抗生素,LC-MS/MS的低檢測限使其成為更佳選擇。
3. 分析成本:LC-MS/MS的設(shè)備和維護成本通常高于HPLC,因此在預(yù)算有限的情況下,HPLC可能更為經(jīng)濟。
4. 分析速度:如果分析速度是關(guān)鍵因素,HPLC可能更適合,因為它的樣品準備和分析過程相對簡單快捷。
液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)技術(shù)優(yōu)勢
高靈敏度:HPLC-MS/MS能夠檢測到極低濃度的喹諾酮類抗生素,這對于確保食品安全至關(guān)重要,因為即使是微量的殘留也可能對人體健康造成影響。
多殘留物同時檢測:該技術(shù)允許同時檢測多種喹諾酮類抗生素,這對于全面評估食品中的抗生素殘留水平非常有用。
減少基質(zhì)效應(yīng):HPLC-MS/MS的前處理步驟相對簡單,可以有效減少基質(zhì)效應(yīng),提高分析的準確性和重現(xiàn)性。
快速分析:相比于其他方法,HPLC-MS/MS的分析速度快,可以大大提高檢測效率,適合大量樣品的快速篩查。
低檢測限:HPLC-MS/MS的方法檢出限通常低于1.0 μg/kg,這意味著即使是極低濃度的喹諾酮類抗生素也能被檢測出來。
符合國家標準:HPLC-MS/MS的操作方法通常遵循國際或國家標準,如GB/T 20366-2006,這有助于確保檢測結(jié)果的可靠性和可比性。
實驗流程
1. 樣品前處理:包括提取、凈化和濃縮,以減少基質(zhì)效應(yīng),提高分析物的純度。
2. 色譜分離:無論采用HPLC還是LC,都需要通過色譜柱對混合物中的不同成分進行分離。
3. 檢測與分析:HPLC使用光譜檢測器,而LC-MS/MS使用質(zhì)譜檢測器進行定性和定量分析。
4. 數(shù)據(jù)處理:對收集到的數(shù)據(jù)進行解析,確定喹諾酮類抗生素的存在狀態(tài)及濃度。
盡管HPLC在一些簡單基質(zhì)或特定抗生素分析中仍有其應(yīng)用價值,但當(dāng)面對復(fù)雜基質(zhì)中多種喹諾酮類抗生素的同時分析需求時,LC-MS/MS以其卓越的性能成為更優(yōu)的選擇。LC-MS/MS不僅能夠提供高精度的定量結(jié)果,還能夠有效避免干擾物質(zhì)的影響,確保分析結(jié)果的可靠性和準確性。